2-NITROPHÉNYL-BÊTA-D-GLUCOPYRANOSIDE CAS : 2816-24-2

Substrat enzymatique : L’ONPG est couramment utilisé comme substrat pour la β-galactosidase, une enzyme qui l’hydrolyse pour produire un composé jaune (o-nitrophénol) facilement détectable par spectrophotométrie. Cette réaction enzymatique permet de mesurer l’activité de la β-galactosidase, faisant de l’ONPG un outil précieux en enzymologie.

Analyses de biologie moléculaire : L’ONPG est utilisé comme substrat dans diverses analyses de biologie moléculaire, notamment dans les tests d’activité du gène rapporteur de la β-galactosidase. Dans ces tests, un substrat à base d’ONPG permet de mesurer l’activité du gène rapporteur, généralement régulée par une séquence promotrice spécifique. L’activité de la β-galactosidase, mise en évidence par le changement de couleur induit par l’hydrolyse de l’ONPG, fournit des informations précieuses sur l’activité du promoteur.

Analyse de l'expression génique : L'ONPG est également utilisé pour l'analyse de l'expression génique. En liant la séquence promotrice d'intérêt au gène de la β-galactosidase, les chercheurs peuvent mesurer l'activité de la β-galactosidase en utilisant l'ONPG comme substrat. Le niveau d'activité de la β-galactosidase reflète la force et l'activité du promoteur, permettant ainsi d'évaluer les niveaux d'expression génique.

Applications diagnostiques : L’ONPG peut être utilisé en diagnostic, notamment pour la détection de micro-organismes pathogènes. Diverses bactéries, comme Escherichia coli et certaines espèces de Shigella et de Salmonella, produisent de la bêta-galactosidase, une enzyme capable de cliver l’ONPG. Cette réaction d’hydrolyse entraîne un changement de couleur visible, permettant de déterminer la présence de ces bactéries dans des échantillons cliniques.