Le phénylgalactoside, également connu sous le nom de p-nitrophényl β-D-galactopyranoside (pNPG), est un substrat synthétique fréquemment utilisé dans les expériences biochimiques et de biologie moléculaire.Il est couramment utilisé pour détecter et mesurer l’activité de l’enzyme β-galactosidase.
Lorsque le phénylgalactoside est hydrolysé par la β-galactosidase, il libère du p-nitrophénol, qui est un composé de couleur jaune.La libération de p-nitrophénol peut être mesurée quantitativement à l'aide d'un spectrophotomètre, car l'absorbance du p-nitrophénol peut être détectée à une longueur d'onde de 405 nm.