IPTG CAS : 367-93-1 Prix fabricant
L'isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) est un analogue synthétique du lactose couramment utilisé dans la recherche en biologie moléculaire et les applications biotechnologiques.L'IPTG est principalement utilisé pour induire l'expression de gènes dans les systèmes bactériens, où il sert de déclencheur moléculaire pour initier la transcription des gènes cibles.
Lorsqu'il est ajouté au milieu de croissance, l'IPTG est absorbé par les bactéries et peut se lier à la protéine répresseur lac, l'empêchant de bloquer l'activité de l'opéron lac.L'opéron lac est un groupe de gènes impliqués dans le métabolisme du lactose et lorsque la protéine répresseur est supprimée, les gènes sont exprimés.
L'IPTG est souvent utilisé en conjonction avec le promoteur mutant lacUV5, qui est une version constitutivement active du promoteur lac.En combinant l’induction de l’IPTG avec ce promoteur mutant, les chercheurs peuvent atteindre des niveaux élevés d’expression génique.Cela permet la production de grandes quantités de protéines pour la purification ou d’autres applications en aval.
En plus de l’expression des gènes, l’IPTG est également fréquemment utilisé dans les tests de dépistage bleu/blanc.Dans cette technique, le gène lacZ est généralement fusionné à un gène d’intérêt, et les bactéries qui expriment avec succès ce gène de fusion produiront une enzyme β-galactosidase active.Lorsque l'IPTG est ajouté à un substrat chromogène tel que X-gal, les bactéries qui expriment le gène de fusion deviennent bleues en raison de l'activité de la β-galactosidase.Cela permet l’identification et la sélection de souches recombinantes qui ont réussi à intégrer le gène d’intérêt.
Induction de l'expression des gènes : l'IPTG est couramment utilisé pour induire l'expression de gènes cibles dans les systèmes bactériens.Il imite l'inducteur naturel le lactose et se lie à la protéine répresseur lac, l'empêchant de bloquer l'opéron lac.Cela permet la transcription et l’expression des gènes souhaités.
Expression et purification des protéines : l'induction par l'IPTG est souvent utilisée pour produire de grandes quantités de protéines recombinantes à diverses fins, telles que des études biochimiques, une production thérapeutique ou une analyse structurelle.En utilisant des vecteurs d’expression appropriés et l’induction de l’IPTG, les chercheurs peuvent atteindre des niveaux élevés de production de protéines cibles chez les hôtes bactériens.
Criblage bleu/blanc : L'IPTG est fréquemment utilisé en combinaison avec le gène lacZ et un substrat chromogène, tel que X-gal, pour les tests de dépistage bleu/blanc.Le gène lacZ est généralement fusionné au gène d’intérêt, et les bactéries qui expriment avec succès ce gène de fusion produiront une enzyme β-galactosidase active.Lorsque l'IPTG et le substrat chromogénique sont ajoutés, les souches recombinantes exprimant le gène de fusion deviennent bleues, ce qui permet une identification et une sélection faciles.
Étude de la régulation génique : L’induction IPTG est couramment utilisée en recherche pour étudier la régulation des gènes et des opérons, en particulier l’opéron lac.En manipulant les concentrations d'IPTG et en surveillant l'expression des composants de l'opéron lac, les chercheurs peuvent étudier les mécanismes de régulation des gènes et le rôle de divers facteurs ou mutations.
Systèmes d'expression génique : L'IPTG est un composant crucial dans plusieurs systèmes d'expression génique, tels que les systèmes basés sur le promoteur T7.Dans ces systèmes, le promoteur lac est souvent utilisé pour piloter l’expression de l’ARN polymérase T7, qui, à son tour, transcrit les gènes cibles sous le contrôle des séquences du promoteur T7.L'IPTG est utilisé pour induire l'expression de l'ARN polymérase T7, conduisant à l'activation de l'expression du gène cible.
| Composition | C9H18O5S |
| Essai | 99% |
| Apparence | poudre blanche |
| N ° CAS. | 367-93-1 |
| Emballage | Petit et encombrant |
| Durée de conservation | 2 ans |
| Stockage | Conserver dans un endroit frais et sec |
| Attestation | ISO. |
